在构建克隆载体的过程中，很多科研人员常常面临繁琐的问题，例如在选择限制性内切酶时的犹豫、复杂的酶切克隆步骤以及耗时的整个过程。有时候，生长出的单菌落甚至没有可用条带，导致不得不重复进行实验。曾经有一位师兄在学习期间，经常需要筛选数十个单克隆以寻找阳性菌落，然而结果往往令人失望。他曾期望能有一种方法，使得每一个生长的单克隆均为重组成功的阳性结果。

传统的酶切克隆和无缝克隆方法依赖于连接酶的作用，通过碱基互补的粘性末端使载体与DNA片段配对，然后在连接酶的帮助下形成完整的质粒。然而，这类方法常常伴随较高的假阳性率，因为连接酶在连接目标片段的同时，也可能导致载体自连。为了应对这一问题，尊龙凯时生物科技推出了一款基于重组酶原理的同源重组试剂盒，能够有效解决假阳性带来的困扰，确保生长的单菌落全部为阳性，甚至实现无需进行菌落筛选即可直接开展后续检测。

01 产品简介

尊龙凯时的CloneUFO® OneStepCloning技术是一种快速、高效且简便的DNA定向克隆方法，适用于将目的基因的PCR产物精确克隆至任意载体的任意位点。该试剂盒以T4噬菌体某基因表达所获得的重组酶为核心，同时包含重组反应所需的缓冲液与重组酶UvsXase。UvsXase可以与常规的酶切和PCR反应体系兼容，使得克隆载体的酶切产物或PCR产物在无需纯化的情况下就能直接用于重组，大幅简化实验步骤。通过将扩增的目的基因PCR产物与线性化载体按比例混合，在UvsXase的催化下，仅需30分钟即可完成转化，实现高达95%以上的克隆阳性率。

02 产品特点

1. 位点无限制：可自由设计重组位点，无需受到限制性内切酶的束缚。
2. 高效快速：重组连接反应仅需30分钟且条件温和。
3. 高特异性：由于重组酶UvsXase的介导，载体自连的情况极少，阳性率超过95%。

03 实验案例

在操作过程中，将PCR产物进行胶回收后，使用尊龙凯时的ATG#C101与其他同类品牌产品对回收片段及同一载体进行重组。待转化至大肠杆菌后，对获得的单菌落进行菌落PCR验证，结果显示，使用ATG#C101重组后生成的单菌落数量适中，但阳性率显著高于其他竞品。

04 产品信息

尊龙凯时的克隆试剂盒为生物科研领域提供了简单、快速且高效的解决方案，助力科研人员克服传统克隆中的各种问题，实现更高的实验成功率。